Biozellen®基質(zhì)膠 特點：
Biozellen®3D類器官培養(yǎng)基質(zhì)膠套裝
Biozellen®基質(zhì)膠 特點：
1、100%植物源材料，無任何動物成分；
2、胺基酸序列100%人源化 ；
3、可調(diào)控基質(zhì)膠硬度進行多種細胞培養(yǎng)；
4、3D細胞/類器官培養(yǎng)種類數(shù)量范圍更廣；
5、無人畜共通病原菌或毒素風險；
6、醫(yī)療級生物原料；
7、高活性、高純度、可融化；
8、2年保存時間；
9、3D培養(yǎng)結(jié)束后基質(zhì)膠可以溫和融化，并保留3D細胞/類器官結(jié)構(gòu)完整性；
Biozellen®3D類器官培養(yǎng)基質(zhì)膠套裝
Catalog No. B-P-00003-2、B-P-00003-4、B-P-00003-10
Specification 2ml-kit、4ml-kit 、10ml-kit
Storage Store at-20℃. 1年保存.
一、產(chǎn)品描述
Biozellen®3D類器官培養(yǎng)基質(zhì)膠套裝包含整套基質(zhì)膠、膠體固定液、膠體溶解液，可應(yīng)用到3D細胞培養(yǎng)與微環(huán)境應(yīng)用等；本試劑盒操作便利且可調(diào)控基質(zhì)膠硬度進行多種細胞培養(yǎng)測試；植物膠體可快速形成水凝膠， 請操作前詳細閱讀此使用指南。
（Biozellen®3D類器官培養(yǎng)基質(zhì)膠材料為植物來源，無動物成分）
二、應(yīng)用
•3D類器官培養(yǎng)。
•3D細胞球體培養(yǎng)試驗
•細胞侵襲
•細胞遷移
•小鼠皮下成瘤
•適合用于3D細胞藥物篩檢平臺
•細胞生長和分化
•代謝/毒理學研究
•體外和體內(nèi)血管生成分析
三、適用細胞種類
• 原代細胞 • 干細胞
四、試劑盒組分
五、使用步驟：
A、試劑制備
A基質(zhì)膠：將A基質(zhì)膠溶于37℃水浴槽回溫10分鐘， 確認*融解.
C緩沖溶液(1X)制備：使用前將10X C緩沖溶液用冰的無細胞培養(yǎng)液(例如： 無血清DMEM、opt-MEM) 制備成 1X C 緩沖溶液。(不要用 PBS 稀釋 C 緩沖液) .
D 緩沖溶液(1X)制備: 使用前用冷的 1x PBS 稀釋 10X D 緩沖溶液至 1X D 緩沖溶液.
B、Biozellen®3D類器官培養(yǎng)基質(zhì)膠的制備
全部步驟需要在無菌環(huán)境內(nèi)操作，操作步驟如下：
1. 將24孔培養(yǎng)板放置于冰箱或者冰上預冷。
2. 細胞計數(shù)后取 2×105~2×107 細胞與 0.5ml 37℃ 培養(yǎng)基均勻混合，并與0.5ml 37℃ A膠按照 1:1 等比例均勻混合，最終細胞密度1*105~1*107cells/mL。
注：請選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)溶液與條件進行試驗。
3.取 20-40 微升步驟 2 含細胞的混合 A 膠溶液滴于 步驟 1 預冷的培養(yǎng)板上，膠體將于 5 分鐘內(nèi)成膠。 注: 測試膠體是否成膠，可用微量吸管尖溫和的觸碰膠體表面進行確認。
4.待膠體成膠后，添加1毫升冰的1X C緩沖溶液，并蓋過步驟3 的膠溶液，固定 15 分鐘。
5.待15分鐘固定后，小心的吸取 C 緩沖溶液并置換為適合此細胞生長之培養(yǎng)基溶液。
6將含有細胞的膠于37°C 二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)進行7~14天的培養(yǎng)，并觀察細胞球體的形成，按正常培養(yǎng)基更換頻率進行更換操作。
C、溶膠與收集細胞球體準備程序
小心的將培養(yǎng)基吸取移除，并用1X PBS進行清洗。
小心的將 1X PBS 吸取移除，并添加 1 毫升冰的D緩沖溶液，蓋過膠滴于室溫反應(yīng) 5分鐘。
溫和的用1毫升移液管吸取，直到膠滴*溶解。
將含有細胞球體的溶液吸入1.5 毫升離心管，用1000 rpm的轉(zhuǎn)速離心10分鐘，移除上清液體并收集細胞球體做分析。B-P-00003-2
D、收集單顆細胞準備程序
在分離單細胞前，先按上述溶膠與收集細胞球體準備程序進行操作
1. 添加trypsin-EDTA并與收集的細胞球體于37°C混合反應(yīng)。
2. 用1毫升移液管混合，直到細胞體*分解。
3. 待細胞球體*分解，加入3倍體積的1X PBS，并用1000轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)速進行離心10分鐘，并移除上清液體收集沉淀的單細胞做分析。
上海市楊浦區(qū)國康路100號2層
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